过柱子（柱层析分离）技巧分享，方法，手段，问题总结

上周的时候和一个师弟聊天，师弟给菜籽传了一个合成群内的聊天记录，看到一个很有意思的问答，瞬间给笑惨了！

菜籽已经在化学行业摸爬滚打十四五年了，之前在药厂的时候一直觉得拿到一个化合物直接过柱子是一个很low的操作。因为菜籽是工厂技术出身，所以拿到化合物的第一个想法就是能不能用结晶，打浆，减压蒸馏，酸碱洗等方法来纯化，如果不能的话还会考虑能不能转化上个保护基啥的，在其他步骤去纯化。

常压过柱是三者中分离效果最好的一种过柱方式，但是因为很多时候溶剂走的太慢，分离效果再好也会影响效率，所以这时候一般会给与压力，这就是所谓加压过柱；但这个压力不宜过高，一般手动的用双链球，自动的就用个养鱼泵，两者都可以如图改装一下。

如果遇到杂质点和产物点挨得比较近的情况，特别是那些荧光又比较弱的，记得不要加压，应选常压过柱，每次接半管或更少就换管，也可以提高纯化几率。

己烷和石油醚<环己烷<甲苯<二氯甲烷<乙酸乙酯<丙酮<<甲醇<水<乙酸

至于国外喜欢用的氯仿和乙醚，不建议使用。

反相硅胶具体就不科普了，但过反相柱有几点需要科普：

①有反向硅胶自然就有反相硅胶板，一般为铝板，两者价格都比较贵，所以要节省使用。

②反向柱体系可以类比HPLC，一般用甲醇-水体系，或乙腈-水体系过柱。过柱极性和正相柱相反，此体系中，甲醇大于水。

13、酸加酸、碱加碱

两个作用，一个是抑制拖尾；一个是防止分解，特别是碱性化合物如亚胺，由于硅胶是酸性的，一定要小心。

14、选择合适的固定相

以上，听说给本文点赞，在看的同仁们都要发nature，science了！！！