荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization， FISH）中的探针按标记分子类型分为放射性标记和非放射性标记。用核素标记的放射性探针的优势在于对制备样品的要求不高，可以通过延长曝光时间加强信号强度；缺点是探针不稳定、自显影时间长、放射线的散射使得空间分辨率不高及核素操作较繁琐等。采用荧光标记系统即FISH技术可以克服以上不足。FISH 技术作为非放射性检测体系，具有以下优点：
①荧光试剂和探针经济、安全；
②探针稳定，一次标记后可在两年内使用；
③实验周期短、能迅速得到结果，特异性好，定位准确；
④FISH 可定位长度在 1kb 的 DNA 序列，其灵敏度与放射性探针相当；
⑤多色FISH通过在同一个核中显示不同的颜色可同时检测多种序列；
⑥既可以在玻片上显示中期染色体数量或结构的变化，也可以在悬液中显示间期染色体 DNA 的结构。
FISH技术的缺点是不能达到 100％杂交，特别是在应用较短的 cDNA 探针时效率明显下降。
原理
荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization， FISH）的基本原理是：如果被检测的染色体或 DNA 显微切片上的靶 DNA 与所用的核酸探针是同源互补的，两者经变性、退火、复性，即可形成靶 DNA 与核酸探针的杂交体。将核酸探针的某一种核苷酸标记上报告分子生物素（或地高辛），可利用该报告分子与荧光素标记的特异亲和素之间的免疫化学反应，经荧光检测体系在显微镜下对待测 DNA 进行定性、定量或相对定位分析。
用途
材料与仪器
仪器：
步骤
8.将片子拿开，在相差显微镜下观察，必要时调整滴片条件。
6.在相差显微镜下观察，必要时调整滴片条件。
四、制备尿道上皮细胞标本
5.过夜老化或在 73℃ 的 2XSSC 溶液中保温 2min。
10.可以进行标本变性。
23.可继续进行杂交操作程序。
18.杂交后标本置于暗处保存。不使用时于 -20℃ 保存。
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